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生化试剂 >> 分子生物试剂及试剂盒 >> 核酸分离与纯化
 

土壤基因组DNA提取试剂盒

Cas  号:

 
分子式:  
订货信息:
货号 品名 规格 包装 单价 货期 库存
1227173266 土壤基因组DNA提取试剂盒 50T 1200元 现货 3天
1227173265 土壤基因组DNA提取试剂盒 100T 2165元 现货 3天
提示信息:偏远地区如新疆西藏宁夏甘肃等地可能无法运送液体,下单前请联系客服。
性 状: 试剂盒内容: 50T      100T
溶液A        25ml     50ml
溶液B         3ml      6ml
溶液C        5ml       10ml
溶液D         10ml      20ml
漂洗液        15ml      15ml×2
洗脱液         10ml     20ml 
吸附柱         50个     100个
收集管          50个     100个
PCR增强剂       500ul    1ml
说明书           1份      1份

注:试剂盒开封后溶液A、B 、C 、D 需在2-8℃保存。PCR 增强剂-20 ℃保存。

质量标准: 产品简介:
本试剂盒适合于从褐土、淤泥、火山灰等各种极端土壤环境中提取微生物 DNA。对土壤中各种细菌、真菌
有很好裂解效果,最大限度的保留了微生物DNA的多态性。 
本试剂盒采用我公司特有的腐殖质吸附材料,可高效专一的去除各种腐殖质成分而丝毫不会影响DNA的
产率,纯度较酚、氯仿抽提法提高数倍。 
使用本试剂盒提取的DNA产量大、完整性好,可直接用于各种常规操作,包括酶切、PCR 、文库构建、
Southern  杂交等实验。
操作步骤:
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机
在室温下离心。
    1、称取土壤样本 0.1-0.5g,在液氮中充分研磨成细粉末,加入 450ul  溶液A  震荡混匀。 
     *  也可直接称取样本 0.1-0.5g 于离心管( 建议使用 2ml  圆底管) ,加入 450ul 溶液 A  剧烈震荡混匀
1-2min 至没有固体块。  使用液氮研磨效果最佳。 
2 、加入50ul 溶液B  充分颠倒混匀(  不要剧烈震荡),65℃水浴 6min,每2min充分颠倒混匀一次。 
3 、加入100ul  溶液C  充分颠倒混匀(  不要剧烈震荡),12000rpm离心10min   。 
4 、将上清转移到新的离心管,12000rpm离心2min   。 
5 、在吸附柱中加入 200ul  溶液D  ,将离心后的上清加入到带有溶液 D  的吸附柱中,用移液器吹吸几次混
匀,12000rpm离心1min。
6 、将收集管中的滤出液混匀后重新吸入吸附柱(  必须),12000rpm离心1min。 
7 、倒掉收集管中的废液,在吸附柱中加入漂洗液 500ul,12000rpm离心1min。 
8 、倒掉收集管中的废液,重复步骤 7  两次(共漂洗三次)。 
9 、倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管,12000rpm离心2min   。 
10、拿出吸附柱在室温干燥数分钟(  因季节及气候等因素不等),或50℃干燥1min。 
11 、将吸附柱放入一个新的离心管中,加入 50-100ul  洗脱液(65  ℃预热),12000rpm离心1min。 
12、将离心管中的液体重新加入到吸附柱中,12000rpm离心1min。离心管中即为土壤微生物 DNA 溶液。
13、若产物PCR 效果差,可以适当稀释 DNA产物,或添加1/10 体积的PCR 增强剂。
注意事项:
1 、新鲜的土壤样本会得到更高的产率,不同样本在采样前应先查阅相应的最佳保存条件。 
2 、若溶液中出现浑浊可在 37℃水浴中溶解片刻至清澈,不会影响结果。 
3 、在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀,否则会堵塞吸附柱,并影响产物纯度。 
4 、洗脱缓冲液的体积最好不少于 50ul ,体积过小会影响回收效率;建议使用试剂盒附带的洗脱缓冲液,
用水洗脱也会损失部分产物;DNA应保存在-20  ℃避免反复冻融,以防降解。 
5 、若产物含有腐殖质残余则会严重影响 DNA的光吸收值,应采取电泳检测和分光光度计检测相结合的方
式鉴定。 
6 、液体试剂避免接触皮肤,若意外接触应立即使用大量清水冲洗。
贮 存: 室温(15℃-25 ℃)  干燥保存,复检期 12 个月,2 ℃-8 ℃保存时间更长。
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