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生化试剂 >> 分子生物试剂及试剂盒 >> 核酸分离与纯化
 

总RNA提取试剂盒

Cas  号:

 
分子式:  
订货信息:
货号 品名 规格 包装 单价 货期 库存
1227173460 总RNA提取试剂盒 50T 1155元 现货 3天
1227173459 总RNA提取试剂盒 100T 1687.4元 现货 3天
提示信息:偏远地区如新疆西藏宁夏甘肃等地可能无法运送液体,下单前请联系客服。
性 状: 试剂盒组成 50 100 保存
有效期
裂解液 50ml 100ml 2-8℃ 一年
漂洗液 15ml 30ml RT 一年
洗柱液 50ml 100ml RT 一年
RNase free ddH2O 15ml 30ml RT 一年
RNase free吸附柱 50个 100个 RT 一年
RNase free收集管(2ml) 50个 100个 RT 一年
质量标准: 操作步骤:
1. 样品处理:
 a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg 组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml 裂解液中混匀。
 b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg 组织加1ml 裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
 c. 贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml  裂解液。用取样器吹打混匀。
 d. 细胞悬液:离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml 裂解液混匀。
 e. 血液处理:取0.2-1ml新鲜血液加3 倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10 分钟,10000rpm离心1 分钟。弃上清,若沉淀含有红细胞,可加入2 倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。离心后沉淀加入1 ml 裂解液混匀。
2. 将处理后的样品在室温放置5 分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。
3. 向匀浆样品中加0.2ml氯仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置3-5分钟。
4. 2-8℃ 12000 rpm 离心10分钟。RNA主要在上层无色的水相中,把水相转移到新管中,不要吸到沉淀。
5. 吸附柱前处理:在吸附柱中加入500ul  洗柱液,室温放置2分钟,2-8  12,000 rpm ℃ 离心2min,弃废液。
6. 第4 步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀,加入吸附柱静置2 分钟,2-8  12000rpm ℃ 离心2min,弃废液。
7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),2-8  12,000 rpm ℃ 离心2min,弃废液。
8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8  12,000 rpm ℃ 离心2min,弃废液。
9. 12000rpm离心2min,弃掉收集管,将吸附柱置于室温放置数分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除。
10.  将吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O ,室温放置5min,12000rpm室温离心2min即得到RNA

注意事项:
1 ,所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品,操作过程要小心,带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。
2 ,RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9 之间,但这并不表示RNA不纯,需电泳检测。

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