首页
Front page
订购流程
Ordering process
售后服务
After-sales service
最新动态
Company News
联系方式
Contact
大宗产品询价
Price inquiry for staple products
 
 
 
化学试剂原料 >> 指示剂/显色剂/染色剂 >> 其他
 

细胞凋亡-Hoechst33258染色试剂盒
Apoptosis - Hoechst33258 dye kits

Cas  号:

 
分子式:  
订货信息:
货号 品名 规格 包装 单价 货期 库存
1227182532 细胞凋亡-Hoechst33258染色试剂盒 100T 1599元 现货 3天
提示信息:偏远地区如新疆西藏宁夏甘肃等地可能无法运送液体,下单前请联系客服。
性 状: 快速简便的细胞凋亡检测 ,由固定液、染色液、荧光封片剂组成,贴壁细胞,适用于悬浮细胞和组织切片。

细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒(Hoechst Staining Kit)是一种采用经典的Hoechst33258进行细胞凋 亡检测的快速简便的试剂盒。当细胞发生凋亡时,染色质会固缩,Hoechst33258 染色后在荧光显微 镜下观察,正常细胞的细胞核呈正常的蓝色,而凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染,或呈碎块状致密 浓染,颜色有些发白。Hoechst Staining Kit 经常用于培养的贴壁或悬浮细胞以及组织切片的细胞凋 亡检测。该试剂盒检测细胞含量范围一般为 0.1~1×106之间。 
1、 可观察蓝光的荧光显微镜或激光共聚焦显微镜

2、 PBS或生理盐水

3、 载玻片、盖玻片

4、 预冷固定液:预冷的70%乙醇或4%多聚甲醛 
(仅供参考):

(一)贴壁细胞

1、取洁净盖玻片在70%乙醇中浸泡5min或更长时间,无菌超净台内吹干或用无菌的PBS或生理盐水 洗涤3次,再用细胞培养液洗涤1次。将盖玻片置于6孔板或其他培养皿内,接种细胞培养过夜, 使融合率约为50%~80%。

2、加入干预条件使细胞发生凋亡后,吸尽培养液,加入Hoechst固定液0.5ml,固定10min或更长时 间(可4℃过夜)。

3、去除固定液,用PBS或生理盐水洗2次,每次3min,吸尽液体。洗涤时宜用摇床,或手动晃动。

4、加入Hoechst 33258染色液0.5ml,孵育5min。也宜用摇床,或手动晃动数次。

5、弃染色液,用PBS或生理盐水洗2次,每次3min,吸尽液体。洗涤时宜用摇床,或手动晃动。

6、滴一滴抗荧封片剂于载玻片上,盖上贴有细胞的盖玻片,让细胞接触封片剂,尽量避免气泡。

7、荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。激发波长350nm左右,发射波长460nm左右。

(二)悬浮细胞

1、离心收集细胞样品于1.5ml离心管内并弃液,加入Hoechst固定液0.5ml,缓缓悬起细胞,固定10min 或更长时间(亦可4℃过夜)。

2、低速离心去除固定液,用PBS或生理盐水洗2次,每次3min。洗涤时手动晃动数次

3、低速离心离心后吸去大部分液体保留约50µl液体,再缓缓悬起细胞,滴加至载玻片上,尽量使细 胞分布均匀。

4、稍晾干,使细胞贴在载玻片上不易随液体流动。

5、滴加Hoechst 33258染色液0.5ml,孵育5min。用吸水纸从边缘吸去液体,微晾干。

6、弃染色液,用PBS或生理盐水洗2次,每次3min,吸尽液体。洗涤时宜用摇床,或手动晃动。

7、滴一滴抗荧光封片剂于载玻片上,盖上一洁净的盖玻片,尽量避免气泡。

8、荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。激发波长350nm左右,发射波长460nm左右。

(三)组织切片

1、常规包埋切片。

2、用PBS或生理盐水洗2次,每次3min。洗涤时手动晃动数次。

3、均匀滴上Hoechst 33258染色液0.5ml,孵育5分钟。

4、弃染色液,用PBS或生理盐水洗2次,每次3min,吸尽液体。洗涤时宜用摇床,或手动晃动。

5、 将切片置于载玻片上,滴一滴抗荧光封片剂,盖上一洁净的盖玻片,尽量避免气泡。

6、荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。激发波长350nm左右,发射波长460nm左右。

质量标准: 注意事项:

1、 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽快检测。使用抗荧封片剂时也应避光操作。

2、 在为了获得细胞沉淀的离心的过程中,对于特殊细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当提高离 心力或延长离心时间。

3、 Hoechst 33258染色液对人体有一定刺激性,请注意适当防护。  4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

贮 存: —20℃,避光,12个月
友情链接
  上海谱振生物科技有限公司 © 2020 All Rights Reserved    备案号:沪ICP备08008528号  
   
   沪公网安备 31012002003054号  沪公网安备 31012002003057号  
 
QQ: 点击这里给我发消息
QQ: 点击这里给我发消息
MSN:
电话: 021-31268003
传真: 021-64897811