首页
Front page
订购流程
Ordering process
售后服务
After-sales service
最新动态
Company News
联系方式
Contact
大宗产品询价
Price inquiry for staple products
 
 
 
化学试剂原料 >> 指示剂/显色剂/染色剂 >> 橙
 

吖啶橙(AO)荧光染色试剂盒
Acridine orange (AO) fluorescence staining kits

Cas  号:

 
分子式:  
订货信息:
货号 品名 规格 包装 单价 货期 库存
1227182533 吖啶橙(AO)荧光染色试剂盒 100T 888元 现货 3天
提示信息:偏远地区如新疆西藏宁夏甘肃等地可能无法运送液体,下单前请联系客服。
性 状: 产品说明:

吖啶橙(Acridine Orange,AO)属于三环杂芳香燃料,可以标记DNA、RNA,属于异染性荧光染料。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。因此AO常用于细胞内DNA和RNA进行检测。AO与核酸结合方式主要有:1、插入性结合,AO嵌入核酸双链的碱基对之间,这种结合方式主要为AO与DNA的结合,其荧光发射峰为530nm,激发后呈绿色荧光;2、静电吸引,带正电荷的AO与单链核酸的磷酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合,这种结合方式主要为AO与RNA的结合,其荧光发射峰为640nm,激发后呈红色荧光,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。因此,吖啶橙嵌合到双链DNA分子中显绿色,与DNA单链或RNA结合时发桔黄色或橙红色荧光。 

吖啶橙染色试剂盒(Acridine Orange Detection Kit)主要由AO Stain、AO Stain Buffer组成,常用于细胞凋亡的检测。染色后在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙染色常与EB染色合用双染,EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

质量标准: 自备材料:

1、 荧光显微镜 

2、 低速离心机 

3、 PBS

4、 细胞计数板 

5、 载玻片、盖玻片 

操作步骤(仅供参考):

(一) AO单独染色

1、 收集细胞(采用流式细胞仪检测时,应先固定细胞),用AO Stain Buffer(1×)清洗细胞1次,加入适量的AO Stain Buffer(1×)重悬细胞,计数并调节细胞浓度至106/ml。 

2、 取适量的细胞悬液和AO Stain,按照细胞悬液:AO Stain=19:1的比例混合,轻轻混匀。如果采用荧光显微镜下观察,一般取95μl细胞悬液和5μl AO Stain混合即可。 

3、 室温避光染色15min,滴加于载玻片上并加盖玻片或上流式细胞仪分析。 

4、 荧光显微镜下观察(激发滤光片波长488nm,阻断滤光片波长515nm),计数并拍照。 

染色结果:

正常细胞 

细胞被均匀染成黄绿色荧光 

凋亡细胞 

染色质浓缩,细胞核碎裂成点状,被染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒 

(二) AO/EB双染色 

1、 收集细胞,用AO Stain Buffer(1×)清洗细胞1次,加入适量的AO Stain Buffer(1×)重悬细胞,计数并调节细胞浓度至106/ml。 

2、 取适量的细胞悬液和AO Stain,按照细胞悬液:AO Stain=19:1的比例混合,并加入适量EB染色液,轻轻混匀。如果采用荧光显微镜下观察,一般取95μl细胞悬液和5μl AO Stain混合即可。 

3、 室温避光染色15min,滴加于载玻片上并加盖玻片 

4、 荧光显微镜滤光片515nm观察,计数并拍照。 

染色结果:

正常细胞 

均匀染成绿色荧光 

坏死细胞 

细胞桔黄色荧光 

凋亡细胞 

染色质浓缩,细胞核碎裂,被染成大小不一、致密浓染的黄绿色颗粒或见胞质芽状突起。 

计算细胞凋亡率和死亡率:

细胞死亡率=凋亡细胞/细胞总数×100%   细胞坏死率=坏死细胞/细胞总数×100%

注意事项:

1. 吖啶橙染色常不EB染色合用,可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。 

2. 如有低温离心机进行离心效果更佳,同时应注意减少试剂暴露于强光下的时间。 

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

贮 存: 4℃,避光,6个月有效。
友情链接
  上海谱振生物科技有限公司 © 2020 All Rights Reserved    备案号:沪ICP备08008528号  
   
   沪公网安备 31012002003054号  沪公网安备 31012002003057号  
 
QQ: 点击这里给我发消息
QQ: 点击这里给我发消息
MSN:
电话: 021-31268003
传真: 021-64897811