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蛋白快速银染试剂盒
Protein quick silver dye kits

Cas  号:

 
分子式:  
别    名: 蛋白银染试剂盒
订货信息:
货号 品名 规格 包装 单价 货期 库存
1227186945 蛋白快速银染 20T 1999元 现货 3天
提示信息:偏远地区如新疆西藏宁夏甘肃等地可能无法运送液体,下单前请联系客服。
性 状: 产品说明 :
蛋白快速银染试剂盒(Protein Fast Silver Stain Kit)是一种快速的可用于 SDS-PAGE 或非变性PAGE 等蛋白银染染色的试剂盒,该试剂盒含有增敏步骤,可明显降低背景。其优点还在于:

1、操作简单、快速;

2、可用于 2D 凝胶的银染,并可进行后续的质谱检测;

3、目的条带清晰;

4、不含甲醇。Protein Fast Silver Stain Kit 与 Protein Silver Stain Kit 相比,前者操作速度更快,当检测灵敏度可能低于后者,尤其是在检测小分子量蛋白质的时候。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

质量标准: 自备材料:
1、 水平摇床或侧摆摇床
2、 去离子水(超纯)
3、 乙醇、冰乙酸
操作步骤(仅供参考) :
1、 准备工作:以下操作以8.5×5.5cm、厚度为1.0mm的凝胶为例,以凝胶全部浸没到溶液为准,一般用量是25ml,对于凝胶体积较大的,各溶液的使用量需按凝胶体积比例放大。整个银染过程应在摇床上进行,摇床转速控制在60~70rpm。提前配制固定液,即按无水乙醇:冰乙酸:去离子水=5:1:4的比例配制。提前配制洗涤液,即按无水乙醇:去离子水=1:4的比例配制。
2、 水洗:电泳结束后,取凝胶放入去离子水中清洗 2 次,每次 5min。
3、 固定:取凝胶放入 50~100ml 固定液中,在摇床上室温摇动 15~20min,重复固定步骤 1 次。
4、 洗脱:取凝胶放入洗涤液中清洗 2 次,每次 5min。
5、 水洗:去离子水清洗凝胶 2 次,每次 5min。
6、 增敏:配制银染增敏工作液,即取 Silver Stain Sensitizer (500×) 0.1ml 加入到 50ml 去离子水中,混匀,即 1×Silver Stain Sensitizer,一般应 2h 内用完。室温下用 1×Silver Stain Sensitizer 孵育凝胶 2min,立即用去离子水清洗凝胶 2 次,每次 1min。
7、 银染: 配制银染工作液, 即取Silver Stain(100×)0.5ml加入到50ml去离子水中, 混匀, 即得1×SilverStain,一般应 2h 内用完。取凝胶入 1×Silver Stain,在摇床上室温摇动 10~20min。
8、 水洗:弃液,在摇床上用去离子水清洗凝胶 2 次,每次 30s,摇动速度在 60~70rpm。总的水洗时间应控制在 1.5min 内。
9、 显影:配制银染显影工作液,即取 Silver Stain Developer(5×)10ml 加入到 40ml 去离子水中,混匀,即 1×Silver Stain Developer,一般应 30min 内用完。清洗凝胶后,立即置于 1×Silver StainDeveloper 中, 室温孵育 2~10min, 直至蛋白条带清晰可见。 一般显色 30s 后就会出现棕色沉淀,继续显影 2~3min,亦可延长至 5min 以上,如果显影效果不佳,可重新更换 1×Silver StainDeveloper 继续显影。
10、  迅速用去离子水清洗凝胶以避免显影过度,背景染色。立即加入银染终止液,摇床上摇动10min,以终止显色反应。(配制银染终止液,即取 Silver Stain Stop Buffer(10×)10ml 加入到 40ml去离子水中,混匀,即 1×Silver Stain Stop Buffer,一般应 24h 内用完。)
11、  保存:弃终止液,加入去离子水 50ml,摇床上摇动 2~5min,弃液。短期保存于新鲜去离子水,长期保存可以制备干胶。
注意事项 :
1、背景过深:①显色时间过长;②洗涤不充分;③凝胶中残留物质未去除干净;④去离子水的纯度过低。
2、蛋白条带较浅:①蛋白的半胱氨酸含量过低;②银染后水洗时间过长;③蛋白量较低;④固定后的洗涤时间不够,导致乙酸残留。
3、凝胶上出现杂质或非蛋白的印迹:①凝胶没有被充分浸没,应加入足量溶液;②容器没有清洗干净;③凝胶接触金属物质;④指纹或其他压迹。
4、本染色液呈酸性,有轻微腐蚀性,使用时请作必要防护。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
贮 存: RT,6个月有效
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